聯(lián) 系 人:段煜
電 話:15214379366
手 機(jī):16602115336
地 址:上海市崇明縣長興鎮(zhèn)潘園公路1800號2號樓9703室(上海泰和經(jīng)濟(jì)發(fā)展區(qū))
郵 編:201913
傳 真:021-80186165
郵 箱:435399850@qq.com
阿儀網(wǎng)商鋪:http://www.app17.com/c110001/
手機(jī)網(wǎng)站:m.jwswbio.com
本公司6月13日14時07分報道:(http://www.app17.com/c110001/products/d11456032.html)
人可溶型鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)ELISA 檢測試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人可溶型鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入 標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下 轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人可溶型鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值), 計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于
-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取 10μL 加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:480、240、120、60、30、0 U/L.
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自動洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在 Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測濃度小于 1.0 U/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10%、板間變異系數(shù)小于 15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
更新時間:2024/5/24 11:45:35
首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 榮譽(yù)證書| 資料下載| 技術(shù)文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網(wǎng) 設(shè)計制作,未經(jīng)允許翻錄必究. 聯(lián)系人:段煜 聯(lián)系電話:15214379366 ICP備案號:滬ICP備15046135號-2 總訪問量:4287966 管理登錄
主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,細(xì)胞株,抗體,生物試劑,化學(xué)試劑,培養(yǎng)基,血清,實(shí)驗(yàn)耗材,ABcam抗體,CST抗體,Santa抗體,ATCC細(xì)胞株,人elisa檢測試劑盒,小鼠elisa試劑盒,大鼠elisa試劑盒,牛elisa試劑盒,羊elisa試劑盒,豬elisa試劑盒,犬elisa試劑盒,植植物elisa試劑盒,elisa 檢測試劑盒報價,試劑盒批發(fā),免費(fèi)代測elisa 試劑盒,細(xì)胞株供應(yīng)商,實(shí)驗(yàn)外包
掃一掃,關(guān)注我們