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點(diǎn)擊次數(shù)：1020 發(fā)布時(shí)間：2021/6/24 18:04:59
細(xì)胞P38激酶總活性光度法定量檢測試劑盒酶標(biāo)儀測定
1）樣品總活性測定
1． 在96孔板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對照和樣品
2． 分別移取xx微升緩沖液（Reagent C）到96孔板里
3． 分別加入xx微升酶促液（Reagent D）
4． 分別加入xx微升反應(yīng)液（Reagent E）
5． 分別加入xx微升底物液（Reagent F）
6． 輕輕搖動96孔板
7． 在30℃溫度下孵育3分鐘
8． 分別加入xx微升陰性液（Reagent G）或待測樣品（100微克細(xì)胞裂解懸液蛋白）到相應(yīng)孔里（注意：樣品須清澈）
9． 輕輕搖動96孔板
10． 即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測：0分鐘讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)
11． 活性計(jì)算：
1） 樣品非特異活性測定
檢測開始前，移取xx微升緩沖液（Reagent C）到1.5毫升離心管，分別加入xx微升專性液（Reagent H）和待測樣品（注意：100微克細(xì)胞裂解蛋白），混勻后，放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育30分鐘。然后繼續(xù)下列操作。
1． 在96孔板上做好相應(yīng)標(biāo)記：待測樣品
2． 移取xx微升緩沖液（Reagent C）到96孔板里
3． 加入xx微升酶促液（Reagent D）
4． 加入xx微升反應(yīng)液（Reagent E）
5． 加入xx微升底物液（Reagent F）
6． 輕輕搖動96孔板
7． 在30℃溫度下孵育3分鐘
8． 加入40微升上述預(yù)處理的待測樣品
9． 輕輕搖動96孔板
10． 即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測：0分鐘讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)
11． 活性計(jì)算：
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